QuEChERS AOAC方法用于大米中農(nóng)藥多殘留的檢測
（Rapid QuEChERS）
一、實驗目的
本研究利用分散固相萃取（QuEChERS）法作為樣品的前處理方法，GC-ECD 和LC-MS/MS法作為分析方法，檢測大米中的農(nóng)藥多殘留。該方法可簡化樣品的前處理過程，節(jié)省有機溶劑的使用，操作簡便。
二、應(yīng)用范圍
本方法適用于含脂類和蠟類物質(zhì)較多的水果、蔬菜和谷物等中農(nóng)藥多殘留檢測及確證
三、參考標準
《AOAC Official Method 2007.01: Pesticide Residues in Foods by Acetonitrile Extractionand Partitioning with Magnesium Sulfate》
四、實驗材料
NuAnalytical Rapid QuEChERS提取管50 mL、Rapid QuEChERS凈化管15 mL。
五、實驗步驟
1、 樣品提取
將大米在-18℃下冷凍，徹底粉碎。準確稱取粉碎好的大米15.0 g于50mL離心管中，加入15 mL 1%乙酸乙腈溶液，再加入QuEChERS萃取鹽包（6 g無水硫酸鎂和1.5 g無水醋酸鈉），用力振搖1min，4000r/min離心5min。上層乙腈層待凈化。
2、樣品凈化
取待凈化的上層乙腈層8mL于15 mL QuEChERS凈化管(1.2g MgSO4、400mg PSA和400 mgC18)中，渦旋1min，4000 r/min離心5min。取上清液1mL，過0.2 μm濾膜，待上機測試。
3、儀器條件
（1）、GC-ECD條件
氣相儀器：Agilent7890A
色譜柱：FB-5,30m×0.32mm，0.25μm
進樣口溫度：220 ℃
檢測器溫度：300℃
升溫程序：180℃(保持2min)，以10℃/min升溫到230℃(保持2min)，以2℃/min升溫到260℃(保持2min)，以25℃/min升溫到270 (保持1.6min)
|
u |
流速：1.6mL/min
進樣方式：分流進樣，分流比10:1
（2）、LC-MS/MS條件
色譜柱：SuperLuC18(2.0mm×150mm，5μm)
質(zhì)譜儀：API4000
流動相：A:0.1%甲酸+10mM乙酸銨(取1 mL甲酸和0.77g乙酸銨至1 L水溶液中)
B:甲醇
洗脫方式：梯度洗脫，梯度洗脫程序如下：
|
|
保留時間/min |
A/% |
B/% |
|
|
0.0 |
95 |
5 |
|
|
|
1.5 |
95 |
5 |
|
|
|
6.0 |
5 |
95 |
|
|
|
11.0 |
5 |
95 |
|
|
|
11.01 |
95 |
5 |
|
|
|
15.0 |
95 |
5 |
|
|
|
流速：0.35mL/min |
柱溫：40 |
℃ 進樣體積：5μL |
|
離子源：電噴霧(ESI) |
掃描模式：正離子模式
檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)
質(zhì)譜儀離子源參數(shù)如下：
氨基甲酸酯類農(nóng)藥各組分名稱、保留時間及母離子和子離子檢測離子對：
|
物質(zhì)名稱 |
保留時間/min |
檢測離子對 |
DP |
EP |
CE |
CXP |
|
涕滅威 |
7.06 |
208.1/89.1 208.1/116 |
30 30 |
10 10 |
22 10 |
12 12 |
|
克百威 |
7.13 |
22.3/123.1 222.3/165.2 |
48 48 |
10 10 |
16 31 |
12 12 |
|
滅多威 |
6.51 |
163.2/88.1 163.2/106.1 |
36 36 |
10 10 |
15 12 |
12 12 |
|
涕滅威砜 |
6.25 |
223.1/86.2 223.1/148.1 |
69 69 |
10 10 |
21 13 |
12 12 |
|
涕滅威亞砜 |
6.10 |
207.1/132.2 207.1/89.1 |
60 60 |
10 10 |
13 22 |
12 12 |
|
甲萘威 |
7.18 |
202.1/145.2 202.1/127.1 |
58 58 |
10 10 |
12 40 |
12 12 |
|
多菌靈 |
6.82 |
192.1/160.1
192.1/132.2 |
68
68 |
10
10 |
34
42 |
12
12 |
六、實驗結(jié)果
1、大米中農(nóng)藥多殘留的添加回收結(jié)果
表1 0.2 mg/kg大米中有機氯類、擬除蟲菊酯類農(nóng)藥多殘留的添加回收結(jié)果
回收率（%）
|
名稱 |
1 |
2 |
3 |
平均回收率（%） |
RSD（%） |
|
五氯硝基苯 |
92.0 |
101.5 |
103.3 |
98.9 |
6.14 |
|
乙烯菌核利 |
93.5 |
100.4 |
102.2 |
98.7 |
4.65 |
|
三唑酮 |
114.5 |
122.5 |
126.5 |
121.2 |
5.04 |
|
腐霉利 |
81.5 |
84.5 |
86.1 |
84.0 |
2.78 |
|
異菌脲 |
113.0 |
109.0 |
113.5 |
111.8 |
2.21 |
|
聯(lián)苯菊酯 |
120.5 |
120.0 |
122.0 |
120.8 |
0.86 |
|
甲氰菊酯 |
100.5 |
99.3 |
101.5 |
100.4 |
1.10 |
|
高效氟氯氰菊酯 |
101.5 |
100.6 |
102.5 |
101.5 |
0.94 |
|
氟氯氰菊酯 |
101.7 |
96.7 |
96.3 |
98.2 |
3.06 |
|
氯氰菊酯 |
78.7 |
70.2 |
70.9 |
73.3 |
6.44 |
|
氟氰戊菊酯 |
126.0 |
130.0 |
119.5 |
125.2 |
4.23 |
|
氰戊菊酯 |
110.0 |
99.5 |
111.4 |
107.0 |
6.08 |
|
氟胺氰菊酯 |
100.5 |
100.2 |
97.45 |
99.4 |
1.69 |
|
溴氰菊酯 |
122.5 |
111.6 |
120.0 |
118.0 |
4.84 |
表2 0 05 mg/kg大米中氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的添加回收結(jié)果
回收率（%）
|
名稱 |
1 |
2 |
3 |
平均回收率（%） |
RSD（%） |
|
涕滅威 |
111.2 |
118.6 |
117.6 |
115.8 |
3.47 |
|
克百威 |
92.6 |
85.2 |
93.4 |
90.4 |
5.00 |
|
滅多威 |
90.0 |
101.4 |
98.2 |
96.5 |
6.09 |
|
多菌靈 |
70.6 |
79.4 |
70.2 |
73.4 |
7.08 |
|
涕滅威砜 |
107.2 |
114.0 |
111.6 |
110.9 |
3.11 |
|
涕滅威亞砜 |
114.0 |
119.8 |
117.8 |
117.2 |
2.51 |
|
甲萘威 |
92.4 |
98.4 |
92.0 |
94.3 |
3.80 |
2、 大米中農(nóng)藥多殘留檢測色譜圖
圖1 添加水平為0.2 mg/kg大米中有機氯和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥多殘留檢測色譜圖
圖2 添加水平為0.05 mg/kg大米中氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘檢測色譜圖
