高效液相色譜儀在使用中可能會遇到壓力過高的問題。壓力突然升高，一般都是由于流路中有堵塞的原因。以下是排查和解決這類問題的步驟：
1. 斷開真空泵的入口處，此時PEEK管里充滿液體，使PEEK管低于溶劑瓶，看液體是否自由滴下。如果液體不滴或緩慢滴下，則是溶劑過濾頭堵塞。如果液體自由滴下，溶劑過濾頭正常，再檢查。
2. 打開Purge閥，使流動相不經(jīng)過柱子，如果壓力沒有明顯下降，則是過濾白頭堵塞。處理方法是將過濾白頭取出，用10%的異丙醇超聲半個小時。如果壓力降至100 PSI（6.7 Bar）以下，過濾白頭正常，再檢查。
3. 把色譜柱出口端取下，如果壓力不下降，則是柱子堵塞。處理方法是如果是緩沖鹽堵塞，則用95%的水沖至壓力正常。如果是一些強(qiáng)保留的物質(zhì)導(dǎo)致堵塞，則要用比現(xiàn)在流動相更強(qiáng)的流動相沖至壓力正常。假如按上面的方法長時間沖洗壓力都不下降，則可考慮將柱子的進(jìn)出口反過來接在儀器上，用流動相沖洗柱子。
此外，影響系統(tǒng)壓力的因素還有流動相的溶劑組成、溫度及流速。具體來說：
1. 流動相的粘度是產(chǎn)生反壓的主要原因。有機(jī)溶劑-水的粘度隨組成與壓力的關(guān)系圖顯示，乙腈-水比例為（20:80）、甲醇-水比例為（40:60至50:50）時，系統(tǒng)的壓力最大。在做實(shí)驗(yàn)時應(yīng)盡量避開這個比例范圍。另外，異丙醇粘度大，一般不作流動相使用。
2. 流速對反壓的影響是線性關(guān)系，流速增加，反壓亦增大。
3. 溫度對反壓的影響是反比關(guān)系，溫度升高，反壓降低，對某些流動相的影響更大一些。
4. 液相色譜儀各模塊之間的連接管路也會產(chǎn)生壓力，系統(tǒng)壓力與管路的長度成正比，與管路直徑的四次方成反比（1/4d）。上述考慮的是柱外因素對系統(tǒng)壓力的影響，色譜柱對系統(tǒng)壓力的影響也很大，反壓與色譜柱長度成正比，與填料顆粒度的平方成反比（2.5μm填料比3.5μm填料反壓高）。
以上信息僅供參考，如遇到無法解決的問題建議聯(lián)系專業(yè)技術(shù)人員尋求幫助或咨詢液相色譜儀品牌廠商尋求解決方案。
