需要知道的LC系統“體積”知識

在LC（液相色譜）系統中，“體積”是一個重要的概念，它涉及多個方面，包括但不限于柱體積、死體積、駐留體積和延遲體積等。以下是需要知道的LC系統“體積”知識：

### 1. 柱體積（Column Volume）

* **定義**：柱體積是指液相色譜柱內填料的總體積，它決定了色譜柱的容量和分離能力。
* **計算方法**：通常可以通過公式V=π×r×r×h來計算，其中r為色譜柱的半徑，h為色譜柱的長度（即圓柱體的高）。但需要注意的是，對于某些品牌的色譜柱，如安捷倫，其柱體積一般是色譜柱的柱管體積乘以65%或60%來計算，這取決于填料的緊密堆積程度和實際使用情況。
* **重要性**：柱體積的大小直接影響色譜柱的分離效率和樣品負載量。較大的柱體積可以提供更好的分離效果和更高的樣品負載量，但也會增加分析時間和溶劑消耗。

### 2. 死體積（Dead Volume, V0）

* **定義**：死體積是指從進樣點到檢測器之間，不參與色譜分離過程的體積。它主要包括進樣器至色譜柱管路體積、柱內固定相顆粒間隙（被流動相占據，Vm）、柱出口管路體積和檢測器流動池體積。
* **重要性**：死體積過大會導致色譜峰展寬和分離度降低，從而影響分析結果的準確性。因此，在液相色譜系統設計中，應盡量減少死體積。
* **測定方法**：系統死體積一般通過進樣基本不保留的小分子（如尿嘧啶、丙酮和硫脲）來測定。死時間（即樣品通過死體積所需的時間）與死體積相關，可以用死體積除以流速來測定。

### 3. 駐留體積（Hold-Up Volume）

* **定義**：駐留體積是指溶劑首次混合點（通常在液相色譜儀的混合腔內或比例閥中）與液相色譜柱頭之間的體積。
* **重要性**：在梯度洗脫或等度洗脫的溶劑組成改變時，駐留體積對于使色譜柱在盡可能短的時間內完成流動相組成的變化非常重要。它確保了樣品和梯度能夠同時到達柱進口，從而提高了分析的準確性和重現性。

### 4. 延遲體積（Delay Volume）

* **定義**：延遲體積與駐留體積在概念上相似，都涉及到溶劑混合點到色譜柱頭的體積。但延遲體積更側重于描述在溶劑組成變化時，系統需要一段時間來穩定流動相組成的現象。
* **重要性**：在梯度洗脫過程中，延遲體積的大小會影響色譜峰的形狀和分離度。較大的延遲體積可能導致色譜峰展寬和分離度降低。

綜上所述，LC系統中的“體積”知識涉及多個方面，包括柱體積、死體積、駐留體積和延遲體積等。了解這些概念及其重要性對于優化液相色譜分析條件、提高分析結果的準確性和可靠性具有重要意義。