分析方法學驗證中的檢測限和定量限

分析方法學驗證是對某種分析方法的性能進行評估和確認的過程，目的是確保該方法在特定的條件下能夠準確、可靠地測量目標分析物。在這一過程中，檢測限（Limit of Detection，LOD）與定量限（Limit of Quantification，LOQ）是兩個至關重要的參數(shù)，它們在評估分析方法的靈敏度、可靠性和有效性方面發(fā)揮著關鍵作用。

一、檢測限（LOD）

定義：檢測限是指試樣中被測物能被檢測出的最低量，它僅作為限度試驗指標和定性鑒別的依據(jù)，沒有定量意義。因此，在檢出限附近不能進行準確的定量，且報告未檢出時應附上方法的檢測限。需要注意的是，不同文獻或?qū)嶒炇抑?，檢測限可能也稱為Detection Limit（DL），具體術語應遵循各機構的規(guī)定。此外，在某些國際質(zhì)量檢驗報告中，LOD可能表示干燥失重（Loss On Drying），因此需特別注意區(qū)分。

確定方法：

直觀法：通過使用已知濃度的待測物質(zhì)，找出能被可靠檢測到的最低濃度。例如，在薄層色譜（TLC）法中，可以制作一系列已知濃度的樣品，逐步測試，直到能明顯看到斑點為止。

標準偏差和標準曲線法：通過多次測定空白樣品和建立標準曲線，可以得到響應值的標準偏差（σ）和標準曲線的斜率（S）。計算公式為LOD=3.3×σ/S。

信噪比法：此方法適用于能顯示基線噪聲的分析技術，如色譜法。通過測定已知低濃度樣品的信號，并與空白樣品的信號進行比較，可以計算出能被可靠檢測出的最低濃度。一般來說，當信噪比達到3:1時，此時的濃度被視為檢測限。

二、定量限（LOQ）

定義：定量限是指試樣中被測物能被定量測定的最低量。對于微量或痕量藥物分析、定量測定藥物雜質(zhì)和降解產(chǎn)物時，應確定方法的定量限。需要注意的是，定量限的測定結果應符合準確度和精密度要求，同時定量限的濃度通常應小于或等于報告限的濃度，以確保報告數(shù)值的準確可靠。與檢測限類似，定量限在某些文獻或?qū)嶒炇抑幸部赡芊Q為Quantitation Limit（QL）。

確定方法：

直觀法：與檢測限的直觀法類似，但更注重于確定能夠進行準確定量測定的最低濃度。

標準偏差和標準曲線法：計算公式為LOQ=10×σ/S。與檢測限的計算公式類似，但系數(shù)不同，以反映定量測定對準確度和精密度的更高要求。

信噪比法：在信噪比為10:1時的濃度被視為定量限。這一比例的選擇是為了確保在定量測定時具有足夠的信號強度和穩(wěn)定性。

三、檢測限與定量限的區(qū)別與聯(lián)系

區(qū)別：

檢測限主要用于定性鑒別和限度試驗，沒有定量意義；而定量限則用于準確測定被測物的含量。

在數(shù)值上，定量限通常高于檢測限，因為定量測定需要更高的信號強度和穩(wěn)定性。

聯(lián)系：

檢測限和定量限都是評估分析方法靈敏度的重要指標。

在實際分析中，通常需要同時考慮檢測限和定量限，以確保分析結果的準確性和可靠性。

四、注意事項

在確定檢測限和定量限時，應嚴格按照相關標準和規(guī)范進行操作，以確保結果的準確性和可靠性。

不同的分析方法和儀器可能具有不同的檢測限和定量限，因此在進行方法學驗證時，應針對具體的分析方法和儀器進行評估和確認。

綜上所述，檢測限和定量限在分析方法學驗證中扮演著至關重要的角色。通過科學、準確地確定這兩個參數(shù)，可以確保分析方法的靈敏度和可靠性，為實際分析提供有力的支持。