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食品中三聚氰胺檢測的固相萃取方法
（PolyClean X- MCX）
一、實驗目的
本研究利用固相萃取法作為牛奶樣品中三聚氰胺檢測的前處理方法，HPLC 法作為檢測手段。PolycClean X-MCX (60 mg/3 mL)柱凈化效果良好，回收率滿足測試要求，重現(xiàn)性好， 與知名廠商同型號柱性能相當。
二、實驗目標物
三聚氰胺 (CAS:108-78-1)
三、應用范圍
本方法適用于食品中三聚氰胺的 HPLC 檢測及確證。
四、參考標準
《GB/T 22388-2008 原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測方法》
五、實驗材料
NuAnalytical PolyClean X-MCX 固相萃取柱 60 mg/3 mL，W 品牌 HLB 固相萃取柱 60 mg/3 mL 。
六、實驗方法
1、 樣品待測溶液制備
稱取 2.0ｇ試樣(精確至 0.001 g)于 50 mL 離心管中，加入 15 mL 1%三氯乙酸溶液和 5 mL乙腈，超聲提取 10 min，再振蕩提取 10 min，4000 r/min 離心 10 min。上清液經(jīng)三氯乙酸溶液潤濕的濾紙過濾后，用三氯乙酸溶液定容至 25 mL，移取 5 mL 濾液，加入 5 mL 水混勻后做待凈化液。
2、活化
依次用 3 mL 甲醇和 5 mL 水活化。
3、上樣和洗脫
將待凈化液轉(zhuǎn)移至固相萃取柱中。依次用 3 mL 水、3 mL 甲醇洗滌，抽至近干后，用 6mL5%氨化甲醇溶液洗脫。整個固相萃取過程流速不超過 1 mL/min。
4、重新溶解
洗脫液于 50 ℃下用氮氣吹干，殘留物用 1 mL 流動相定容，渦旋混合 1 min，過微孔濾膜后，供 HPLC 測定。
5、HPLC 條件
色譜柱：SuperLu C18 (250×4.6mm，5μm)
檢測器：UV@240 nm
流動相： 離子對試劑緩沖液(準確稱取 2.10 g 檸檬酸和 2.16 g 辛烷磺酸鈉，加入約 980
mL 水溶解，調(diào)節(jié)PH 至 3.0 后，定溶至 1 L 備用)-乙腈(80:20, v/v)
洗脫方式：等度洗脫
柱溫：室溫
流速：1.0 mL/min
進樣量：20μL
七、實驗結果
1、2.5mg/kg 牛奶基質(zhì)中三聚氰胺的添加回收結果
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表 2 W 品牌 MCX 柱 2.5mg/kg 牛奶基質(zhì)中三聚氰胺的添加回收結果
回收率（%）
名稱
平均回收率（%）
1
2
三聚氰胺
71.99
80.24
76.12
2、添加水平為 2.5mg/kg 牛奶基質(zhì)中三聚氰胺檢測色譜圖
圖 1 添加水平為 2.5mg/kg 牛奶基質(zhì)中三聚氰胺檢測色譜圖
